1 材料與方法
豬甲狀腺球蛋白( porcinethyroglobulin,pTg) 、完全弗氏佐劑( complete Freund' s adjuvant,CFA) 、不完全弗氏佐劑( incomplete Freund's adjuvant,IFA) ( 美國 Sigma 公司) ; 三碘甲狀 腺原氨酸( triiodothyronine,T3) 試劑盒、四碘甲狀腺 原氨酸 ( tetraiodothyronine,T4) 試劑盒、甲狀腺球蛋 白抗體( thyroglobulin antibody,TgAb) 、甲狀腺過氧 化物酶抗體( thyroid peroxidase antibody,TPOAb) ( 德 國 Roche 公司) ; 促甲狀腺激素( thyroid stimulatinghormone,TSH ) ELISA 試 劑 盒 ( 武 漢 云 克 隆、 CEA463Mu) ; Glu ELISA 試劑盒( 武漢華美公司) ; 兔單克隆抗體囊泡谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白( vesicular glutamate transporter,VGLUT) 1、興奮性谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 ( excitatory glutamate transporter,EAAT) 2 及內(nèi)參一 抗 GAPDH( 美國 Abcam 公司) ; 辣根過氧化物酶標(biāo) 記山羊抗兔 IgG 抗體( 美國 Millipore 公司) ; 超敏顯影液( 美國 Thermo 公司) ; 化學(xué)發(fā)光成像儀( 上海 Tanon 公司) ; 高速臺式冷凍離心機(jī)( 安徽嘉文儀器 裝備有限公司) ; 低速迷你離心機(jī)( 海門市其林貝爾儀器制備有限公司) ; 普通 PCR 儀( 杭州晶格科學(xué)儀器公司) ; 微量移液器( 德國Eppendorf 公司) ; 微板 孔迷你離心機(jī)( 杭州奧盛儀器有限公司) ; 逆轉(zhuǎn)錄試 劑盒、熒光定量 PCR 儀( 美國 Thermo Scientific 公 司) ; 形態(tài)學(xué)圖像分析系統(tǒng)( Image-ProPlus 6. 0,美國 Media Cybernetics 公司) 。
2 結(jié)果
通過將 pTg 結(jié)合弗氏完全佐劑和弗氏不 完全佐劑注射于 NOD 小鼠尾根部建立 HT 動物實(shí) 驗(yàn)?zāi)P?,結(jié) 果 顯 示 HT 組 小 鼠 僅 表 現(xiàn) TgAb 和 TPOAb 升高,甲狀腺 HE 染色結(jié)果見大量淋巴細(xì)胞 浸潤及部分甲狀腺濾泡破壞,提示 HT 造模成功。 HT 造模成功后,將健康 NOD 雄鼠與 2 組小鼠合籠, 選取妊娠小鼠。
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